580 КОЛИЧЕСТВЕННЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ФЕРМЕНТОВ
женин перекиси водорода. Но если применять вместо перекиси водорода гидроперекись этила, на которую каталаза не действует, то оказывается, что оксигемоглобин, так же как и лимфоидная ткань, ускоряет реакцию окисления иодистоводородной кислоты. С другой стороны, Бателли и сотр. считают, что окисление муравьиной кислоты перекисью водорода в присутствии крови и различных животных тканей дает возможнось обнаружить и определять количественно животную пероксидазу, хотя при этом они оговариваются, что окислительную способность крови надо приписать, по крайней мере в значительной степени, красящему веществу крови - оксигемоглобину; они высказывают мнение, что пероксидаза, которая окисляет муравьиную кислоту, идентична с пероксидазой, окисляющей поди-стоводородную кислоту. Вольф и Штеклин 10 считают, что оксигемоглобин как при окислении иодистоводородной кислоты, так и при окислении других субстратов в присутствии перекиси водорода обнаруживает то же самое каталитическое действие, что и растительная пероксидаза. Виль-штеттер и Полингер (I.e.) нашли, что оксигемоглобин проявляет свойства и действие пероксидазного фермента, и, повидимому, высказываются за его ферментативную природу.
Так как нас прежде всего интересовал практический вопрос - целесообразность определения «пероксидазного» показателя крови химическим путем, то мы и пытались установить, насколько пероксидазное действие крови совпадает с действием содержащегося в ней оксигемоглобина и покрывается последним. Ниже мы сообщаем результаты опытов, поставленных в различных направлениях.
РАСТВОРЫ КРОВИ, ОДИНАКОВЫЕ ПО ИНТЕНСИВНОСТИ ОКРАСКИ, ПРОЯВЛЯЮТ ОДИНАКОВЫЕ ПЕРОКСИДАЗНЫЕ ДЕЙСТВИЯ
Пробы крови, взятые у различных лиц, при одинаковом разведении их водой обнаруживают в большинстве случаев различную интенсивность окраски и различное пероксидазное действие. Колебания в пероксидазных действиях могут быть отнесены или за счет различного содержания оксигемоглобина в пробах или, если допустить, что в крови наряду с оксиге-моглобином существует особая пероксидаза, за счет различного содержания этого фермента. Если последнее допущение правильно, то доллшы быть растворы крови, которые при одинаковой интенсивности окраски проявляют различные пероксидазные свойства. Опыты с кровью людей и кроликов не подтвердили этого предположения. Кровь набиралась у людей из кончика пальца, у кроликов-из вены уха пипеткой в 20 кубических миллиметров. Тотчас же после взятия пробы крови гемолизировались в 20 см3 дистиллированной воды и полученные растворы (1 : 1000) располагались в 4 ряда по степени интенсивности их окраски. В каждом ряду неодинаково окрашенные растворы доводились соответственным разведением водой до интенсивности окраски самой слабой пробы (№ 1 каждого ряда). В неодинаково окрашенных растворах определялся показатель пе-рокспдазы по методу Баха и Зубковой.
1 см3 соответственных растворов крови смешивался с 7 см3 воды, 1 см3 0.1%-ного раствора гваякола и 1 см31%-ного раствора перекиси водорода, и после 15-минутного стояния при комнатной температуре количества окисленного гваякола определялись в колориметре Аутенрита. Клип колориметра содержал соответствующую по цвету смесь азотнокислого кобальта и бихромата калия и был прокалибрирован сравнением с окраской продуктов полного окисления (в присутствии растительной перокспдазы) определенных количеств гваякола. Показатель пероксидазы выражался в
|