Избранное
ЭБ Нефть
и Газ
Главная
Оглавление
Поиск +
Еще книги ...
Энциклопедия
Помощь
Для просмотра
необходимо:


Книга: Главная » Бах А.Н. Собрание трудов по химии и биохимии
 
djvu / html
 

540 КОЛИЧЕСТВЕННЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ФЕРМЕНТОВ
Количество разложенной HjO, (в мг)
при 17 при 37
16.92 16.24 14.63 16.11
тазы ....
Раствор крови Раствор каталазы
Что при разбавлении крови дестиллированной водой в раствор переходят все ферменты форменных элементов, в том числе, и протеаза,- не подлежит никакому сомнению. Тотчас после перехода ферментов в раствор протеаза начинает действовать на каталазу, и обусловливаемое этим понижение действия каталазы увеличивается с возрастанием температуры от 0 до 47 . Чем выше температура, при которой производится опыт, тем быстрее протекает действие протеазы, тем меньше обнаруживается действие каталазы. Так как, с другой стороны, скорость, с которой протекает реакция каталазы, как и других ферментов, возрастает с увеличением температуры, то при определении каталазы в растворе крови определяется, собственно говоря, только та часть каталазы, которая не разрушена протеазой; определяется равнодействующая двух реакций: разложения перекиси водорода каталазой и разложения каталазы протеазой. Величина этой равнодействующей зависит от относительных количеств того и другого фермента и от температурного коэффициента обеих реакций.
Как видно из последующего ряда опытов, действие каталазы в нашем растворе крови увеличивается отО до 17 быстрее, чем действие протеазы; выше этой температуры происходит обратное явление.
• Количество И202, разложенное 1 см3 раствора крови
Температура ( С) 0 5 10 15 17 20 25 30 35 37 40 Н202 (в мг) 16.61 17.27 17.90 18.34 18.75 18.15 17.62 16.12 14.63 14.25 14.04
Указанные взаимоотношения каталазы и протеазы естественно приводят к мысли измерять действие последней уменьшением активности первой. Эта мысль была уже высказана Вэнтингом и Штехе, которые впервые исследовали влияние протеазы на каталазу. Однако до сих пор эту мысль не удалось подтвердить, вероятно, из-за трудностей иметь постоянные растворы каталазы для определения протеазы. Но это неудобство совершенно отпадает при определении протеазы в растворе крови. В лаковой крови мы имеем готовый раствор каталазы и готовый раствор протеазы. Остается только определить уменьшение действия каталазы, вызванное влиянием протеазы при повышенной температуре, чтобы получить числовое выражение действия протеазы.
Комбинированное определение каталазы и протеазы производится следующим способом.
В три эрленмейровские колбочки а, Ъ и с наливают по 7 см3 воды; колба а получает 1 см3 кипяченого раствора крови, колбы Ь и с по 1 см3 активного раствора крови. Колбы а и и оставляют при 17 , с - при 37 на 1 час. По истечении этого времени колбу с охлаждают до 17 и в каждую из трех колбочек прибавляют по 2 см3 1%-ной перекиси водорода, оставляют еще на полчаса при 17 , затем каждую колбу подкисляют 3 см3 10%-ной H2S04 и титруют 0.1 N раствором перманганата до розового окрашивания. Разность между а и Ь, перечисленная на миллиграммы Н202, дает то количество перекиси, которое разлагается 1 см3 активного раствора крови при 17 (показатель каталазы). Разность ме-

 

1 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 350 360 370 380 390 400 410 420 430 440 450 460 470 480 490 500 510 520 530 540 541 542 543 544 545 546 547 548 549 550 560 570 580 590 600 610 620 630 640 650 660 670


Общая органическая химия, промышленные технологии - Сборники статей. Справочники