Избранное
ЭБ Нефть
и Газ
Главная
Оглавление
Поиск +
Еще книги ...
Энциклопедия
Помощь
Для просмотра
необходимо:


Книга: Главная » Бах А.Н. Собрание трудов по химии и биохимии
 
djvu / html
 

480 ОКИСЛИТЕЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ В ЖИВЫХ ОРГАНИЗМАХ
римых частей на бумажном фильтре. Исследование растворов показало, что они содержат большие количества инвертазы и мальтазы, но ни малейшего следа пероксидазы. Контрольные опыты с прибавленными заранее ничтожными количествами пероксидазы показали, что раствор совершенно не содержит задерживающих веществ. Аналогичный опыт, поставленный с зимином, дал такие же результаты.
На основании всех этих фактов я считаю возможным утверждать, что дрожжи не содержат пероксидазы, которую можно было бы обнаружить обычными реактивами; этим они резко отличаются от других живых организмов. Причину этого различия можно усматривать только в приспособлении дрожжей к анаэробным условиям существования. Единственным известным до сих пор каталитическим действием, которое оказывает пер-оксидаза, является ускорение окислительного действия перекиси водорода и органических перекисей. Эти перекиси образуются при действии свободного молекулярного кислорода на ненасыщенные, легкоокисляемые вещества. Другими словами, действие пероксидазы находится в тесной связи с кислородным дыханием клетки. Если жизнь клетки происходит в отсутствии кислорода, то она не нуждается в пероксидазе и поэтому не производит ее. Поэтому отсутствие пероксидазы в строго анаэробных дрожжах легко понятно. Однако не исключена возможность, что те сорта дрожжей, которые частично используют свободный кислород, содержат большее или меньшее количество пероксидазы. Для выяснения этого вопроса существует только один путь: сравнительные опыты с чистыми культурами дрожжей верхнего и нижнего брожения. Этими чистыми культурами засевались обычным способом и всегда в тех же условиях питательные среды, причем с дрожжами верхнего брожения проводились параллельные опыты с пропусканием стерильного воздуха. По окончании брожения смеси исследовались следующим образом.
Реакция с парафенилендиамином. 10 см3 хорошо взболтанной смеси смешивались с 1 см3 0.2 N раствора парафенилендиамина и 1 см3 0.3%-ного раствора перекиси водорода.
Реакция на пероксидазу. 10 см3 сброженной смеси, 1 см3 1%-ного гваякола, 1 см3 0.3%-ной перекиси водорода.
Проба на задерживающие вещества. К пробам оставшегося бесцветным гваякола прибавлялось по 1 капле раствора пероксидазы, отмечалось время, необходимое для появления определенного красно-коричневого окрашивания.
Реакция на пергидридазу (восстановительный фермент). К 15 см3 перебродившей смеси прибавлялось 0.5 г нитрата натрия и 0.2 г фтористого натрия (для исключения живых клеток); смесь оставлялась на 1 час в термостате при 50 , после чего переводилась количественно в мерную колбу на 30 см3; после прибавления 1 см3 1%-ного раствора основного уксуснокислого свинца и доведения водой до черты жидкость фильтровалась через сухой фильтр. В фильтрате (15 см3) содержание нитрита определялось колориметрически посредством ос-нафтиламина и сульфаниловой кислоты в уксуснокислом растворе.
После этого все смеси были отфильтрованы, осадки промыты в 200 см3 воды и высушены в течение 24 часов при 35 . С высушенными осадками были поставлены реакции с парафенилендиамином и гваяколом.
В заключение осадки были еще раз промыты в 600 см3 воды для удаления образовавшихся задерживающих веществ и испытаны упомянутыми реактивами. Результаты этих опытов сведены в нижеследующей таблице (стр. 481).
Из этих опытов вытекает, что пероксидаза не встречается ни в чистых культурах дрожжей верхнего брожения, ни в чистых культурах нижнего

 

1 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 350 360 370 380 390 400 410 420 430 440 450 460 470 480 481 482 483 484 485 486 487 488 489 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580 590 600 610 620 630 640 650 660 670


Общая органическая химия, промышленные технологии - Сборники статей. Справочники