460 ОКИСЛИТЕЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ В ЖИВЫХ ОРГАНИЗМАХ
мента были приготовлены из грибов и могли содержать тирозиназу. Поэтому нельзя считать доказанным, что изученные им процессы окисления вызывались исключительно полифенолоксидазой.
Мы задали себе труд, хотя его можно было считать почти излишним, проверить наблюдения Буркло с чрезвычайно чистыми препаратами фено-лазы и пероксидазы. Полученный нами результат вполне ясен и однозначен: фенолаза, не содержащая тирозиназы, и равноценная ейсистема «перо-ксидаза-перекись водорода» окисляют монофенолы и моноамины так же, как полифенолы и полиамины. Обозначение «полифенолоксидаза», которая предполагает существование «монофенолоксидазы», таким образом, лишено основания.
ВЫВОДЫ
I. Влияние солей (хлористый кальций, уксуснокислый кальций, сернокислый цинк, уксуснокислый цинк, сернокислый марганец, уксуснокислый марганец, сернокислый алюминий) на действие фенолазы при окислении различных субстратов (гваякол, гидрохинон, пирогаллол, орсин, а-нафтол-парафенилендиамин) зависит от природы субстрата. Так например, хлористый кальций задерживает окисление гваякола и пирогаллола и ускоряет окисление других субстратов. Сернокислый цинк ускоряет окисление гваякола и реактива Реман-Шпицера и задерживает окисление во всех других случаях.
II. Между гидролитическим расщеплением солей и их способностью влиять на действие фенолазы нет прямой зависимости. Гидролитическая расщепляемость солей является только одним из факторов, влияющих на действие фенолазы.
III. Соли влияют специфически на самопроизвольное окисление субстратов (в отсутствии фенолазы).
IV. Нет никаких оснований предполагать, что явления специфичности, проявляющиеся при действии фенолазы, обусловливаются существованиеч специфических фенолаз. Наблюдающуюся специфичность надо рассма тривать как свойства субстратов, а не свойства фермента.
V. Явления специфичности, вероятно, обусловливаются тем, что субстраты образуют с солями комплексные соединения,свойства которых, в том числе и их способность окисляться, отличны от свойств первоначальных субстратов.
VI. Опыты, поставленные с целью изолирования предполагаемых специфических ферментов, содержащихся в фенолазе, не дали результатов. При обработке фенолазы кислотами в тех условиях, которые необходимы для полного превращения ее действия на гидрохинон, и последующем осаждении кислого раствора фермента спиртом был получен препарат, который вновь окислял гидрохинон. Фракционированное осаждение спиртом в присутствии сернокислого магния также дало отрицательный результат.
VII. Проверка некоторых данных, касающихся существования специфически действующих фенолаз, дала следующие результаты:
1) отсутствие окисления гваякола свежим картофельным соком объясняется не отсутствием специфически действующей «гваяколазы», а легкой восстанавливаемостью продуктов окисления гваякола. Наряду с процессом окисления в картофельном соке протекают восстановительные процессы, которые перекрывают окисление гваякола, но не перекрывают окисления гидрохинона и пирогаллола. При прибавлении перекиси водорода или избытка фенолазы равновесие смещается в сторону окислительных процессов, и окисление гваякола немедленно выявляется;