Избранное
ЭБ Нефть
и Газ
Главная
Оглавление
Поиск +
Еще книги ...
Энциклопедия
Помощь
Для просмотра
необходимо:


Книга: Главная » Бах А.Н. Собрание трудов по химии и биохимии
 
djvu / html
 

430 ОКИСЛИТЕЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ В ЖИВЫХ ОРГАНИЗМАХ
30 кг белой репы измельчались в мясорубке; из отжатой массы было получено 20 л сока, к которому прибавлялось 2 л 96%-ного спирта для коагуляции слизистых веществ. После фильтрования сок осаждался 130 л крепкого спирта , образовавшийся осадок отфильтровывался, промывался спиртом и освобождался от последнего в вакууме. Полученная пероксидаза-сырец (52 г) растиралась с 600 см3 воды, причем только незначительная часть ее переходила в раствор. Нерастворенная часть отфильтровывалась и промывалась небольшим количеством воды; к 600 см3 фильтрата, содержащего только около 7 г сухого вещества, прибавлялось 40 г уксуснокислого свинца в порошке. По истечении 24 часов образовавшийся осадок отфильтровывался, промывался небольшим количеством воды; к фильтрату (600 см3) прибавлялся уксуснокислый натрий в порошке до прекращения появления мути. Потреблено: 21 г сухого уксуснокислого натрия. После удаления осадка путем фильтрования щелочный фильтрат (6UO см3) диализировался против дестиллированной воды. Предварительные опыты показали, что для диализа нельзя применять ни пергаментную бумагу, ни гильзы фирмы Шлейхер, так как пероксидаза довольно быстро диализирует через такого рода мембраны. Лучшие результаты получены с настоящим пергаментом, хотя и он пропускает значительные количества пероксидазы. Для приготовления диализатора на широкое горло склянки, дно которой было вырезано, натягивался большой кусок пергамента; полученный таким образом пергаментный мешок наполовину наполнялся раствором пероксидазы и погружался на одну треть в дестиллированную воду.
В начале диализа при смешивании 2 см3 раствора пероксидазы с 1 г пирогаллола в 70 см3 воды и 30 см3 1%-ного раствора перекиси водорода получалось 0.310 г пурпурогалина. После 6-дневного диализа (вода в наружном сосуде менялась ежедневно 5-6 раз) объем жидкости в диализаторе составлял 735 см3. Из 2.6 см3 этой жидкости (т. е. 2 см3 исходного раствора пероксидазы) получалось с 1 г пирогаллола и 30 см3 раствора перекиси водорода - 1.59 г пурпурогалина. При выпаривании досуха 20 см3 раствора пероксидазы в платиновой чашке получился остаток, составлявший после высушивания до постоянного веса при 115 -0.041 г. Сухой остаток был осторожно сожжен в той те самой чашке. Получен о: 0.0015 г = 3.6% золы. Таким образом, при диализе активирующая способность пероксидазы уменьшилась приблизительно вдвое, но содержание сухого вещества упало с 7 до 1.23 г. 700 см3 диализированного раствора пероксидазы подвергались дальнейшему диализу в течение 6 дней. На 13-й день диализ был прерван, так как я опасался, что количество остающейся в диализаторе пероксидазы будет недостаточным для проведения опыта. Диализированный раствор пероксидазы, объем которого не изменился заметно за время второй стадии диализа, представлял собою опа-лесцирующую, легко фильтрующуюся жидкость, которая не становилась прозрачной при повторном фильтровании. Осадок, полученный при прибавлении 4.5 л 99%-ного спирта к 670 см3 диализата, переводился через 24 часа на уплотненный фильтр, промывался абсолютным спиртом и высушивался в вакууме.
Пероксидаза, очищенная описанным выше способом, получилась в виде легкого серовато-белого порошка, вес которого составлял всего 0.780 г. Препарат содержал 7.87% воды, 81.66% органического вещества и 1.47%
Эта операция была любезно выполнена для нас Ницбергом и Полоновским на фабрике Химических продуктов, за что мы выражаем им и здесь нашу искреннюю благодарность.

 

1 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 350 360 370 380 390 400 410 420 430 431 432 433 434 435 436 437 438 439 440 450 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580 590 600 610 620 630 640 650 660 670


Общая органическая химия, промышленные технологии - Сборники статей. Справочники