Избранное
ЭБ Нефть
и Газ
Главная
Оглавление
Поиск +
Еще книги ...
Энциклопедия
Помощь
Для просмотра
необходимо:


Книга: Главная » Бах А.Н. Собрание трудов по химии и биохимии
 
djvu / html
 

410 ОКИСЛИТЕЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ В ЖИВЫХ ОРГАНИЗМАХ
нить влияние иода на активацию перекиси водорода пероксидазой при окислении фенолов, поскольку и этот окислительный процесс можно количественно изучать благодаря образованию пурпурогалина из пирогаллола. Задержка активации под влиянием иода в этом случае была бы верным доказательством того, что пероксидаза с ее известными свойствами является смесью различных специфических ферментов.
Опыты были поставлены сначала с водно-спиртным экстрактом из корней хрена, приготовленным описанным ранее способом2. Содержание осаждаемой спиртом пероксидазы в этом экстракте было определено следующим образом: к 100 см3 экстракта прибавлялся 1 л абсолютного спирта; образующийся осадок количественно переводился на взвешенный фильтр, промывался абсолютным спиртом и высушивался при 30 в вакууме над хлористым кальцием. Получено: 0.520 г пероксидазы. Последняя растворялась количественно в 100 см3 воды и 20 см3 этого раствора (соответствующие равному объему исходного экстракта), смешивались с 1 г пирогаллола в 50 см3 воды и 30 см3 1 %-ного раствора перекиси водорода: образующийся пурпурогалин переводился через 24 часа на взвешенный фильтр, промывался 200 см3 воды и высушивался при 105 до постоянного веса. II о л у ч е н о: 0.230 г пурпурогалина. 20 см3 исходного экстракта, обработанные тем же способом пирогаллолом и перекисью водорода, дали 0.227 г пурпурогалина. Из этого определения вытекает, что при применении достаточного количества спирта пероксидаза высаждается количественно, т. е. без потери активирующей способности.
Определение активирующей способности пероксидазы описанным ранее способом3 показало, что 20 см3 экстракта (= 0.104 г твердой пероксидазы) активируют 0.11 г перекиси водорода.
Исследование влияния иода на активирующую способность пероксидазы было поставлено следующим образом: 160 см3 экстракта смешивались с 40 см3 раствора иода; через определенные промежутки времени к порциям по 25 см3 этой смеси прибавлялся пирогаллол (1 г в 45 см3 воды) и перекись водорода (30 см3 1 %-ного раствора); образующийся пурпурогалин взвешивался. Для приготовления раствора иода навеска химически чистого иода растворялась в свежеперегнанном спирте. Были поставлены три серии опытов, с возрастающими количествами иода и одинаковыми количествами пероксидазы, причем для каждой серии ставились контрольные опыты с соответственным количеством иода в отсутствии пероксидазы и с 20 см3 экстракта без прибавления иода. Предварительными опытами было установлено, что перекись водорода активируется при окислении пирогаллола свободным иодом так же, как пероксидазой,- в этом случае из пирогаллола образуется пурпурогалин, содержащий иод .
Результаты этих трех серий опытов сведены в таблице на стр. 411.
Применять большие количества иода нельзя было, так как его действие перекрыло бы действие пероксидазы. Из приведенных выше данных следует, что:
1. При применении 0.0075 г иода на 20 см3 экстракта активирующая способность пероксидазы остается без изменения в течение первых часов, а затем начинает медленно возрастать. Избыток пурпурогалина составлял после 200 часов действия иода 0.069 г, т. е. 30.1% количества пурпурогалина, которое получалось в начале опыта.
Пурпурогалин характеризовался окрашиванием в синий цвет в присутствии щелочей, растворимостью в концентрированной серной кислоте с оранжево-красной окраской и образованием нафталина при перегонке с цинковой пылью. Остаток после перегонки содержал иод в виде йодистого цинка. Последний экстрагировался горячей водой; к отфильтрованной жидкости, подкисленной уксусной кислотой после охлаждения, прибавлялась перекись водорода в присутствии крахмального клейстера. Смесь немедленно окрашивалась в синий цвет.

 

1 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 350 360 370 380 390 400 410 411 412 413 414 415 416 417 418 419 420 430 440 450 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580 590 600 610 620 630 640 650 660 670


Общая органическая химия, промышленные технологии - Сборники статей. Справочники